Оценка качества эмбрионов в программах эко

Содержание:

День второй
Этапы роста и развития эмбриона в процессе культивации
День первый
Категории
Как происходит оценка качества эмбрионов при ЭКО
Почему на УЗИ не виден эмбрион?
Классификация эмбрионов на стадии бластоцисты.D.Gardner, et al., 1999.
- Степень зрелости бластоцисты:
- Внутриклеточная масса (ВКМ):
Оценка оплодотворения
Качество
Культивация Эмбрионов
День четвертый
Полезная информация
Из каких этапов состоит культивирование эмбрионов?
Фрагментация эмбриона — что это?
Стоимость культивирования эмбрионов
Стоимость культивирования эмбрионов

День второй

На второй день культивации клетка делится на две. Образуются бластомеры.

Бластоме?ры — клетки эмбрионов на этапе дробления. Оплодотворенная яйцеклетка делится на две дочерние клетки, называемые бластомерами. Каждый бластомер делится на две новые дочерние клетки, которые также получают название бластомеров.

Критериями качества эмбриона на данном этапе являются его:

размеры;
форма;
степень фрагментации (объем, который внутри эмбриона занимают безъядерные элементы цитоплазмы);

Чем больше внутри эмбриона бластомеров и чем меньше степень фрагментации, тем более качественным он считается. Такой зародыш имеет большой потенциал к дальнейшему нормальному развитию.

Многие эмбриологи используют классификацию, отражающую качество эмбрионов с помощью четырех букв латинского алфавита. Вот эта классификация:

А – безъядерных фрагментов нет, высококачественный эмбрион;
В – фрагментация до 20%, эмбрион среднего качества;
С – содержание безъядерных элементов цитоплазмы больше 20%, но не достигает 50%, эмбрион удовлетворительного качества;
D – количество ануклеарных (безъядерных) фрагментов цитоплазмы превышает 50%, такой эмбрион считается некачественным.

Также в этой классификации используются цифры, которые отражают количество бластомеров. Чем их больше, тем продукт слияния мужской и женской половых клеток считается лучше. Например, эмбрион «4В» оценивается более высоко, чем «3С». Ведь в нем больше бластомеров и меньше фрагментация.

Этапы роста и развития эмбриона в процессе культивации

Что может быть после переноса эмбрионов? 6 основных жалоб

После оплодотворения зигота проходит ряд изменений, свидетельствующих о правильном развитии:

на следующий день после оплодотворения клетка исследуется на наличие пронуклеусов — клеточных ядер родительских гамет. Наличие двух пронуклеусов (2PN) -нормальное оплодотоворение. Зиготы с нормальным оплодотворением отбираются и культивируются дальше. Если пронуклеусы не просматриваются под микроскопом, яйцеклетка считается не оплодотворенной (0PN). Аномальным оплодотворением считается наличие 3-х (ЗPN) и более пронуклеусов. Яйцеклетки не оплодотворенные и с анамальным оплодотворением не культивируются.
во второй день развития эмбрион проходит 2 последовательных митотических деления дробления и, в норме, имеет 4 бластомера расположенных в форме тетраэдра, равных по размеру, одноядерных, без фрагментации (Grade 1) (по классификации 4A (цифра 4 обозначает количество бластомеров, буква А -бластомеры хорошего качества ), (Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology, 2011)
для 3-го дня развития оптимальным считается 8-клеточный эмбрион с равными по размеру, одноядерными бластомерами, без фрагментации. По международной классификации обозначение 8А (Grade 1)
на четвертый день эмбрион формирует морулу, состоит из 12- 16 плотно прилегающих друг к другу бластомеров, начинается первая клеточная дифференциация: наружные клетки морулы в дальнейшем будут формировать трофэктодерму (ТЭ), внутренние клетки-внутреннюю клеточную массу (ВКМ) При естественной беременности на этой стадии происходит мигрирование морулы из маточных труб в матку.
на пятый и шестой день предимплантационного развития эмбриона формируется бластоцита — сфера с внутренней полостью (бластоцель), выстланная рядом клеток трофэктодермы (трофобласт, из которого в дальнейшем формируются различные экстраэмбриональные структуры) и компактная группа клеток внутренней клеточной массы (эмбриобласт- клетки самого зародыша). Перенос бластоциты высокоэффективен, каждая вторая подсадка заканчивается беременностью.

День первый

Какой оптимальный день для переноса эмбрионов при эко?

Сразу после оплодотворения доктор проверяет признаки того, что процедура ИКСИ, ПИКСИ или ЭКО проходит успешно. Для этого он смотрит, как выглядят пронуклеусы, и оценивает их:

наличие;
количество;
внутреннюю структуру;
симметричность;
внешний вид.

Пронуклеусы – это ядра половых клеток (мужских и женских), которые еще не слились. Изучая их вид, можно оценивать перспективы, качество и жизнедеятельность будущих эмбрионов.

Критерии нормы:

пронуклеусов должно быть два;
они должны располагаться рядом;
их размеры должны быть одинаковыми;
внутри должны визуализироваться «ядрышки» (пронуклеоли);
«ядрышки» должны иметь правильное расположение и количество.

На данном этапе развития эмбрионов может формироваться множество патологий, которые ведут к их гибели. Например:

присутствие одного пронуклеуса вместо двух (оплодотворение не состоится);
наличие трех пронуклеусов (эмбрион нежизнеспособен, так как будет иметь тройной хромосомный набор).

Плохие эмбрионы сразу отбраковывают. Нет смысла их пересаживать. Даже если они не погибают на этапе культивации, организм женщины сам отторгает такие зародыши. В результате если беременность наступает, она очень быстро прерывается. Это происходит уже в первые недели гестации.

Гестация, гестационный возраст новорожденного (от лат. gestatio ношение) — количество полных недель беременности, прошедших между первыми сутками последней менструации роженицы и моментом перерезания пуповины во время родов.

Категории

Беременность после переноса эмбрионов из «пробирки»

При культивации эмбрионов врач производит условную оценку бластоцист. Это помогает выбрать самые качественные клетки для дальнейшей подсадки. Врач оценивает степень зрелости, внутриклеточную массу и толщину наружного слоя. Выставляя оценку из одной цифры и двух букв соответственно.

Рассмотрим, что означают эти цифры и буквы.

1 — не зрелая, полость составляет половину объема;

2 — бластоциста не больше, чем дробящийся эмбрион;

3 — бластоциста намного больше дробящегося эмбриона, полость большая;

4 — полость занимает всю бластоцисту, она начинает пробиваться через оболочку;

5 — бластоцисты продолжает разрывать оболочку;

6 — бластоциста без оболочки.

Первая буква А характеризует содержимое клетки, то есть ту массу, из которой будет в дальнейшем формироваться ребенок:

А — качественная, клеток много;

В — относительно качественная, имеет небольшие отклонения;

С — наблюдаются серьезные нарушения;

D — очень плохое качество бластоцисты.

Вторая буква описывает состояние внутриклеточной оболочки, от которой в последствии будет зависеть процесс прикрепления плода к стенке матки.

А — отличное качество, слой состоит из большого количества клеток;

В — есть небольшие отклонения, например, клеток меньше, либо они располагаются в два слоя;

С — клеток мало, слой плохого качества;

D — очень плохое качество слоя.

Таким образом, можно сделать вывод, что самый качественный эмбрион будет с обозначением 4АА и 5AA. Допустимы к подсадке все бластоцисты, кроме самых плохих и незрелых, который по определению не смогут имплантироваться.

Как происходит оценка качества эмбрионов при ЭКО

Оценка качества эмбрионов при ЭКО происходит ежедневно. У ЭКО ИКСИ – есть преимущество – эмбриолог точно знает время оплодотворения в отличие от классического ЭКО, так как проводит процедуру самостоятельно. Это позволяет вести наблюдение за развитием с момента оплодотворения и оценивать эффективность развития более точно.

Сейчас существует оборудование, позволяющее вести запись дробления, которая используется для выбора самого качественного эмбриона. Характеристики, полученные при оценке, записываются в журнал, чтобы иметь возможность отслеживать динамику. Сразу после оплодотворения – слияния полярных телец яйцеклетка должна поделиться и образоваться два бластомера. Если этого не происходит или образуется больше клеток – эмбрион оценивается как некачественный.

Для определения хороший эмбрион или плохой существует много критериев:

Внешний вид. Клетки должны быть правильной, равной и симметричной формы, внешняя оболочка – без утолщений.
Соответствие дню развития по количеству клеток.
Степень фрагментации – процентное соотношение безъядерных клеток (их еще называют кусочки цитоплазмы) к нормальным бластомерам (клеткам). Цитоплазматическая фрагментация бластомеров – это отсоединение от клетки фрагментов цитоплазмы, окруженной мембранной, но без ядерного содержимого. В норме каждый бластомер должен иметь ядро. Чем выше процент фрагментации, тем хуже прогноз для дальнейшего развития. Считается, что 25% фрагментации – вариант нормы. Часто мелкие фрагменты могут опять участвовать в дальнейшем построении других клеток. Фрагментация более 25% – признак снижения жизнеспособности. Тем не менее, фиксируются случаи, когда зародыши с высокой степенью фрагментации на 5 и 6 день становятся качественными или бластоцистами. Поэтому фрагментированные эмбрионы не отбраковываются а культивируются до 5–6 суток. У них есть шанс.
Размеры. Клетки должны быть равными по объему и правильной формы.
Наличие включений. Любые включения – неблагоприятный признак. Вакуоли – цитоплазматические включения, окруженные мембранной и содержащие жидкость, снижают частоту формирования хороших эмбрионов. Зиготы с выраженными вакуолями могут не вступать в дробление или происходит цитолизис – разрушение клеток.
Равномерность деления, чем короче промежуток времени эмбрион имеет непарное количество бластомеров, тем лучше. Например, короткий промежуток между тремя и четырьмя клетками говорит о том, что два бластомера на двухклеточной стадии поделились равномерно. Кроме этого, деление должно происходить в определенное время.

Почему на УЗИ не виден эмбрион?

Рассмотреть даже нормально развивающийся плод сразу после зачатия невозможно – он слишком небольшой, чтобы ультразвуковой сканер смог различить его на фоне окружающих тканей и органов. Поэтому стандартно первое УЗИ для подтверждения беременности делается на 6-7 неделе после зачатия. До этого момента о том, что женщина будет матерью, можно судить только по уровню хорионического гонадропина человека, который начинает выделяться хорионом (плодной оболочкой эмбриона) на 6-7 день после зачатия. В норме при успешном развитии беременности концентрация ХГЧ в организме растет вместе с развитием плода.

Чтобы понять механизм анэмбрионии, необходимо разобраться со строением самого эмбриона и его ранним развитием. Оно происходит в несколько этапов:

Зигота – по сути, это оплодотворенная яйцеклетка, образующаяся в момент зачатия;
Морула – следующая стадия, характеризующаяся делением зиготы на несколько однотипных клеток;
Бластула – зародыш, в котором клетки уже разделены на внутреннюю клеточную массу (эмбриобласт) и наружный слой (трофобласт);

Именно на стадии бластулы образуется будущее тело эмбриона и окружающие его защитные оболочки. Когда зародыш покидает фаллопиеву трубу и опускается в маточную полость, выделяемые наружными клетками ферменты частично растворяют эндометрий, и происходит его имплантация. Далее эмбрион и околоплодные оболочки развиваются параллельно, постепенно образуя сформировавшийся плод и плаценту.

При анэмбрионии этот процесс нарушается – внешняя оболочка (плодное яйцо) продолжает расти, выделяя ХГЧ, в то время как эмбрион либо не формируется вообще, либо его развитие прекращается на ранней стадии. Из-за этого некоторое время анализы дают ложный результат, показывая нормальную беременность. Лишь через некоторое время хорион прекращает выделять ХГЧ, уровень которого постепенно начинает снижаться.

Причины остановки роста эмбриона, приводящие к пустому плодному яйцу, изучены не полностью. Сегодня к ним относят:

Генетические аномалии. В большинстве случаев к анэмбрионии приводят патологические хромосомные мутации, либо изначально свойственные родителям, либо появляющиеся вследствие неудачной рекомбинации генов в их организме. Также возможны генетические нарушения в самом эмбрионе, возникающие на ранних стадиях его развития.
Инфекции. Среди них наиболее опасны для эмбриогенеза болезни, входящие в комплекс TORCH – краснуха, герпес, цитомегаловирус, токсоплазмоз, сифилис, гепатиты В и С и т. д. Инфекционные возбудители могут поражать материнский организм, нарушая его репродуктивную функцию (например, вызывая хронический эндометрит), или сам эмбрион, приводя к сбоям в его развитии.
Внешние факторы. В первую очередь это относится к ионизирующему излучению (радиации) и токсичным химическим веществам (ядам, некоторым лекарствам). Они вызывают функциональные расстройства репродуктивной системы матери или генетические мутации в эмбрионе, останавливая его нормальное развитие.
Эндокринные нарушения. Расстройства желез внутренней секреции женщины также может привести к анэмбрионии. Особенно вероятно появление плодного яйца без эмбриона при дефиците или нарушении обмена прогестерона – полового гормона, играющего важную роль в децидуализации (морфологическом изменении) эндометрия в точке имплантации зародыша.
Иммунные нарушения. Довольно часто причиной неправильного развития эмбриона является его повреждение защитной системой материнского организма. Это может происходить опосредованно – например, когда зародыш попадает под «перекрестный огонь» иммунных клеток, атакующих инфекцию. Иногда эмбрион сам расценивается иммунитетом женщины как чужеродный объект, ведь его генетический код наполовину состоят из генома другого человека (отца).

Анэмбриония может вызываться как одним из этих факторов, так и их комплексным воздействием. Предугадать развитие этой патологии невозможно – она наблюдается даже у абсолютно здоровых женщин, уже имевших опыт успешной беременности.

Данную аномалию следует отделять от замершей беременности. При анэмбрионии зародыш не формируется вообще, а во втором случае его развитие прекращается на ранней стадии. При этом по внешним проявлениям и на УЗИ эти патологии могут выглядеть одинаково.

Сделайте первый шагзапишитесь на прием к врачу!

Записаться на прием к врачу

Классификация эмбрионов на стадии бластоцисты.D.Gardner, et al., 1999.

Степень зрелости бластоцисты:

1 степень — ранняя бластоциста, полость бластоцисты меньше половины объема эмбриона.
2 степень — полость бластоцисты больше половины объема эмбриона.
3 степень — полная бластоциста. Полость полностью занимает объем эмбриона.
4 степень — расширенная бластоциста. Полость бластоцисты становится больше и начинает истончаться ZP.
5 степень — трофэктодерма ничинает проникать через ZP.
6 степень — вылупившаяся бластоциста, покинувшая ZP.

Внутриклеточная масса (ВКМ):

А — плотно упакованная с большим количеством клеток.
В — более свободная группировка среднего количества клеток.
С — незначительное количество клеток

Оценка оплодотворения

После забора яйцеклеток и сперматозоидов, в течение 3-5 часов производится оплодотворение. Оценка его успешности осуществляется утром на следующий день.

Процесс оплодотворения яйцеклетки по дням

В первые сутки развития оплодотворенная яйцеклетка называется зиготой. При успешном оплодотворении через 18 часов в зиготе появляются 2 пронуклеуса. При появлении большего количества пронуклеусов, эмбрион считается аномально оплодотворенным и исключается из культивирования.

На 2 сутки начинает происходить дробление зиготы. Внутри нее появляются бластомеры (Б) — одинаковые по размерам крупные клетки. При неравномерности Б и их фрагментации судят о наличии отклонений.

На третьи сутки количество Б продолжает увеличиваться. Классификация проводится точно так же, как и на 2 день. На 4 день зигота переходит в стадию морулы. Морула состоит из 10-16 бластомеров и имеет более гладкую поверхность, чем накануне. Также на 4 сутки начинает появляться полость внутри эмбриона.

На 5 сутки эмбрион становится бластоцистой. У бластоцисты внутриклеточная полость занимает 50% объема. В это время клетки уже начинают дифференцироваться и делятся на 2 типа:

Трофобласты. Составляют наружный слой. Они влияют на внедрение эмбриона в стенку матки. Из трофобластов в дальнейшем будет формироваться плацента и другие внезародышевые оболочки.
Эмбриобласты. Составляют внутренний слой. Именно из них будет формироваться будущий плод.

Снаружи бластоциста окружена блестящей оболочкой. При пересадке эта оболочка разорвется и бластоциста выйдет наружу.

Качество

5 клеточный эмбрион считается нормой и достаточно часто применяется в медицинской практике. Для того, чтобы процедура ЭКО прошла успешно, обязательно проводится культивирование гамет. Качество эмбрионов для переноса при ЭКО зависит от многих факторов.

От чего зависит качество эмбрионов при ЭКО:

экология;
вредные привычки;
наличия заболевания половых органов;
иммунная система;
лишний вес;
несбалансированное питание;
стрессовые ситуации;
гормональные сбои.

Классы эмбрионов в ЭКО говорят о качестве биоматериала, от которого зависит исход процедуры.

Качество эмбрионов и их классы тесно связаны друг с другом. Существует 4 класса:

класс А – полностью отсутствую безъядерные фрагменты;
класс В–не более 20% безъядерных фрагментов от общего объема;
класс С – содержание ануклеарных фрагментов от 21% до 50%;
класс D – содержится более 50% безъядерных фрагментов, категория не используется для дальнейшего проведения процедуры.

Фрагментация эмбриона при ЭКО чаще всего говорит о каких-либо генетических нарушениях со стороны женских или мужских репродуктивных органах.

Культивация Эмбрионов

Выращивание эмбрионов происходит в специальных инкубаторах, где автоматически поддерживается определенная влажность, газовый состав, температура.

Культивация эмбрионов происходит в особой среде, которая по своим основным параметрам является аналогом внутренней среды полости матки.

Женщине проводят гормональную терапию, целью которой является стимулирование функции яичников. Процедура экстракорпорального оплодотворения начинается с трансвагинальной пункции, во время которой репродуктолог берет забор фолликулярной жидкости, содержащей женские яйцеклетки.

Выделенные яйцеклетки культивируются до момента оплодотворения в лабораторных условиях. Параллельно с выделением яйцеклеток происходит забор генетического материала мужа. Сперма обрабатывается с целью выделения самых жизнеспособных и активных сперматозоидов.

Затем оплодотворяют женскую яйцеклетку полученным концентратом семенной жидкости.

Культивация Эмбрионов при ЭКО по дням

Развитие эмбриона при ЭКО продолжается около пяти суток с момента пункции и состоит из следующих этапов:

Результатом слияния яйцеклетки и сперматозоида является образование зиготы. Этот клеточный цикл длится 24 часа. Затем происходит интенсивное деление клеток зиготы, в результате деления образуются две равноценные клетки, которые называются бластомерами. Из бластомеров при последующем делении образуются все клетки человеческого тела;
На второй день деление эмбриона достигает стадии восьми бластомеров. На этой стадии бластомеры приобретают специализацию. Это самый уязвимый этап для зародышей, на котором может возникнуть блок развития и эмбрион полностью прекращает деление;
На третий день количество бластомеров достигает 12-14. Межклеточные связи уплотняются, эмбрион выглядит как шарик с идеально гладкими контурами. Эта стадия развития эмбриона носит название морула. Именно на этой стадии при естественном развитии событий эмбрион спускается в матку. Во многих клиниках на этом этапе развития эмбрион считают полностью созревшим для имплантации;
При достижении стадии шестнадцати бластомеров, которая наступает на четвертые сутки. И носит название бластоциста. Начинается процесс кетчинга, который можно сравнить с выклевом птенчика из яйца. Эмбрион выходит из блестящей оболочки и становится способным к успешному переносу в полость матки. Культивирование эмбриона до стадии бластоцисты позволяет сделать процедуру ЭКО более физиологичной.

Ежедневно репродуктолог фиксирует качество эмбрионов, все параметры зародышей описываются в специальном журнале — протоколе. Подсадка эмбрионов происходит на 3-5 сутки после пункции.

Из всех развившихся эмбрионов выбирают те, приживление которых наиболее вероятно. Критерием отбора служат морфологические признаки. К ним относятся:

Степень фрагментации. Этот параметр определяет соотношение нормальных бластомеров к клеткам, не имеющим ядра;
Количество клеток эмбриона должно точно соответствовать дню развития;
Клетки должны быть одинакового размера и иметь правильную форму.
Деление должно происходить в определенное время и быть равномерным;
В эмбрионе хорошего и отличного качества должны отсутствовать включения. Присутствие включений цитоплазмы — плохой признак.

На основании этих признаков разделяют классы эмбрионов ЭКО.

День четвертый

Если бы развитие эмбриона происходило в естественных условиях, он попал бы в полость матки на четвертый день после оплодотворения. До этого времени он находится в маточной трубе.

На четвертый день зародыш состоит из 10-16 бластомеров. Он становится более компактным – занимает небольшой объем относительно количества клеток. Его поверхность выглядит более гладкой, чем на третий день.

Морула – так называется стадия развития эмбриона на данном этапе. В переводе это означает «тутовая ягода». Так эмбриологи назвали его именно за внешнее сходство с этой ягодой.

Заканчивается данная стадия кавитацией. Так называется процесс образования полости внутри эмбриона.

Полезная информация

Из каких этапов состоит культивирование эмбрионов?

При успешном нормальном развитии после оплодотворения, в ходе доимплантационной жизни эмбрион должен пройти разные этапы развития. В норме на 2-е сутки эмбрион образует 4 клетки (бластомера), на 3 сутки — 8 клеток, затем происходит компактизация (слияние клеток), на 4 сутки образуется морула, которая затем на 5 сутки развивается в бластоцисты.

Эмбрион на стадии бластоцисты имеет сферическую форму и состоит из двух типов клеток — внутриклеточная масса и трофэктодерма. Трофэктодерма — наружный слой клеток, из которого впоследствии развивается плацента, а внутриклеточная масса — внутренний слой клеток, из которого затем развивается сам плод.

На каждом этапе доимплантационного развития эмбриона оценивается его качество, чтобы впоследствии выбрать на перенос наиболее перспективный для наступления беременности эмбрион. Качество эмбрионов в нашей лаборатории оценивается на 3 и 5–6 сутки развития. Эти дни наиболее информативны и оценка происходит по общепризнанным классификациям.

На 3 сутки оценивается количество образовавшихся бластомеров (клеток) эмбриона, их форма и размер, наличие или отсутствие фрагментации, степень фрагментации, наличие вакуолей и пр.

Фрагментация эмбриона — что это?

Фрагментация эмбриона — это отделение безъядерных (ануклеарных) фрагментов клеток эмбриона. При оценке качества эмбриона оценивается степень фрагментации выраженная в процентах.

Если фрагментация составляет более 35%, это может говорить о плохом качестве эмбриона, в дальнейшем приводящая к деградации эмбриона и остановке развития. Такой эмбрион не является перспективным для наступления беременности. При оценке качества эмбрионов, все показатели записываются в эмбриологический протокол для того, чтобы впоследствии выбрать наиболее перспективный эмбрион для переноса.

На 5 сутки при благополучном развитии эмбрион образует бластоцисту, состоящую из внутриклеточной массы и трофэктодермы. На данном этапе развития оценивается размер бластоцисты (степень экспансии), а также качество ВКМ и ТЭ, в соответствии с общепринятой классификацией.

Качество эмбрионов зависит от многих факторов. От качества исходно полученных клеток, от эмбриологического этапа, от генетических факторов, от возраста пациентов и особенностей анамнеза пациентов и пр. В случае получения плохих эмбрионов выбирается индивидуальная тактика. Эмбрион плохого качества имеет сниженные шансы на имплантацию и наступление беременности. Перенос такого эмбриона возможен, например, в случае отсутствия альтернативных вариантов.

Перенос эмбрионов осуществляется в свежем или крио цикле. Его можно проводить начиная со вторых суток развития, но оптимально — на 5 сутки, когда эмбрион сформировал бластоцисту. До этого момента есть возможность наблюдать динамику развития эмбрионов, чтобы впоследствии выбрать наиболее хорошо развивавшийся эмбрион и тем самым повысить шансы на беременность. В исключительных случаях перенос эмбриона осуществляется на 3 или 4 сутки.

Стоимость культивирования эмбрионов

Название	Цена
Культивирование гамет и эмбрионов	20500 руб.

Указаны цены на самые востребованные услуги со скидкой 30%, которая действует при оплате наличными или банковской картой. Вы можете обслуживаться по полису ДМС, оплачивать отдельно каждый визит, заключить договор на программу ЭКО или внести депозит. Услуги оказываются на основании заключенного договора.

Принимаются к оплате пластиковые карты MasterCard, VISA, Maestro, МИР. Также доступна бесконтактная оплата картами Apple Pay, Google Pay и Android Pay.